Identificación fenotípica, molecular y sensibilidad antibiótica de bacterias endofíticas asociadas a vitroplantas de plátano (Musa spp)

Resumen

La proliferación de bacterias endofíticas representa un desafío crítico para la viabilidad de la micropropagación de plátano (Musa spp.), comprometiendo la sanidad y el desarrollo de los explantes durante su establecimiento in vitro. El objetivo de esta investigación fue identificar bioquímica y molecularmente bacterias endofíticas asociadas con vitroplantas de plátano y evaluar la eficacia de cinco antibióticos para su control. La investigación se desarrolló entre abril de 2022 y septiembre de 2023 en el Centro Nacional de Cultivo de Tejidos del Instituto Nicaragüense de Tecnología Agropecuaria - Centro Nacional de Investigación Agropecuaria (actualmente Ministerio Agropecuario) y en el Laboratorio de Microbiología de la Universidad Nacional Agraria, Managua, Nicaragua. Se analizaron 690 explantes sintomáticos de las variedades Cuerno Enano, Cuerno Gigante y CEMSA ¾, procedentes de siete subcultivos en la etapa de multiplicación del proceso de micropropagación. Los aislados bacterianos se obtuvieron a partir de tejidos internos de hojas y tallos mediante desinfección superficial e incubación en agar nutritivo; posteriormente, se realizó su caracterización morfológica y bioquímica, seguida de la amplificación y secuenciación del gen 16S rRNA en tres aislados bacterianos para establecer su identidad taxonómica. Se determinó la sensibilidad de nueve aislados bacterianos en cinco antibióticos de amplio espectro mediante el método de difusión en disco, utilizando un diseño experimental completamente al azar. De los 690 explantes, 485 (70.29 %) presentaron sintomatología de contaminación endofítica (microorganismo en el tejido vegetal), con incidencia variable entre subcultivos (52 % – 100 %). A partir de 24 aislados bacterianos se identificaron preliminarmente los géneros Pseudomonas (10 aislados), Staphylococcus, Micrococcus y Stenotrophomonas. La secuenciación confirmó la presencia de Stenotrophomonas maltophilia (aislados 19 y 25) y Bacillus cereus (aislado 57). En la evaluación de susceptibilidad, los aislados T58, T59 y T38 resultaron los más sensibles, con inhibiciones superiores al 80 % destacando ampicilina y cloranfenicol, que superaron el 85 % de efectividad, mientras que T19, T62 y T68 exhibieron una marcada resistencia con valores cercanos al 0 %; el aislado T19 fue el más resistente de la población. Estos resultados confirman que la eficacia de los tratamientos antimicrobianos depende intrínsecamente del perfil de sensibilidad de la microbiota endofítica prevalente, lo que resalta la necesidad de implementar protocolos de saneamiento ajustados a la composición bacteriana local.